日本亚洲洲精品码无无专区,丰满人妻熟妇乱又伦精品软件 ,妻子的秘密免费读全文,夜夜精品无码一区二区三区

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 實驗室細(xì)胞貼壁問題探究
實驗室細(xì)胞貼壁問題探究
點擊次數(shù):604 更新時間:2024-01-29

        細(xì)胞貼壁細(xì)胞(除腫瘤細(xì)胞外)在體外培養(yǎng)條件下,完成貼壁后均為單層生長,原因是貼壁細(xì)胞有接觸性抑制的特點。一般認(rèn)為接觸抑制是細(xì)胞間的一種識別作用,對于動物細(xì)胞的形態(tài)形成與穩(wěn)定具有重要性的作用。由于貼壁細(xì)胞的一面是緊貼在培養(yǎng)瓶上的,如果其上方存在細(xì)胞與其相粘附,那么下方的細(xì)胞很快就會缺乏營養(yǎng)餓死。

不貼壁的一些原因:

1. 胰酶消化時間把控不當(dāng):消化不夠細(xì)胞本身就是成團(tuán)的;若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞膜蛋白損傷,使細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。

2. 缺少貼壁因子:血清中含有促貼壁因子,而無血清培養(yǎng)基工藝中由于缺少這種促貼壁因子,細(xì)胞的貼壁效果會下降很多。

3. 支原體或細(xì)菌的污染。

4. 培養(yǎng)液配制、儲存不當(dāng),如pH值過堿,Gln量太少等原因。

5. 復(fù)蘇的細(xì)胞本身狀態(tài)不好,已經(jīng)老化,失去貼附性。

6. 接種細(xì)胞數(shù)目太少,無法分泌足夠的細(xì)胞外基質(zhì)。

7. 復(fù)蘇時處理速度太慢,復(fù)蘇過程不當(dāng)。

如何促進(jìn)細(xì)胞貼壁:

1. 適度消化細(xì)胞:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。

2. 最好用塑料瓶培養(yǎng),如果是玻璃瓶,那么可以用鼠尾膠原包被一下培養(yǎng)瓶,或者用鹽酸對培養(yǎng)瓶進(jìn)行蝕刻,或者涂Laminin/fibronectin/collagen/BSA,也可以幫助細(xì)胞貼附新的培養(yǎng)瓶,細(xì)胞不易貼壁,建議加多聚賴氨酸處理。

3. 正確配制消化液或培養(yǎng)液。

4. 使用合適的細(xì)胞外基質(zhì)或貼壁試劑。

5. 復(fù)蘇新的細(xì)胞,第一周用20%血清幫助細(xì)胞復(fù)原。

6. 傳代接種一定要鋪的均勻,避免細(xì)胞抱團(tuán)生長。

7. 細(xì)胞傳代24小時之內(nèi),最好不要晃動,以免影響貼壁。

8. 體內(nèi)上皮細(xì)胞生長在膠原構(gòu)成的基膜上,因此培養(yǎng)在有膠原的底物上有利于生長。人或小鼠表皮細(xì)胞培養(yǎng),可以用γ射線照射后的3T3細(xì)胞為飼養(yǎng)層,另外降低pH、Ca2+含量和溫度,均有利于上皮細(xì)胞生長。


欧美精产国品一二三区别| 精品国产免费一区二区三区| 国产精品亚洲А∨无码播放 | 欧美私人情侣网站| 最近中文字幕大全免费版在线| 亚洲精品无码永久在线观看你懂的| 国产H视频在线观看| 中文字幕久精品免费视频| 久久偷看各类wc女厕嘘嘘| 亚洲综合精品香蕉久久网| AV国产剧情MD精品磨豆| 国产无遮挡又黄又爽免费视频 | 久久99国产精品成人| 久久久国产打桩机| 成人国产片女人爽到高潮网站| 色欲AV自慰一区二区三区| 女人高潮久久久久久久| 白少洁第1一40章免费阅读| b站免费版入口| 東京热AV精品人妻一区二区三区| 精品无码国产av一区二区| 国产精品久久无码一区二区三区网| 人妻无码一区二区不卡无码av | 亚洲av不卡一区二区三区| 国产娇小粉嫩学生免费网站| 蜜桃成人免费视频在线播放| 国产成A人亚洲精V品久久网| 免费观看完整视频app| 精品午夜福利在线观看| 久久99精品久久久久久水蜜桃| 亚洲AV永久无码精品尤物| 国产激情久久久久99蜜桃| 无码AⅤ精品一区二区三区浪潮 | 久久久av精品波多野结衣| 亚洲AV午夜福利精品香蕉麻豆| 久久精品国产99国产电影网| 欧美大成色WWW永久网站婷| 丰满人妻熟妇乱又伦精品软件 | 国产精品黄在线观看免费软件 | 亚洲精品无码一区二区| 99亚洲精品自拍AV成人软件|