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大鼠ELISA試劑盒使用技巧建議
點擊次數(shù):825 更新時間:2018-12-03
  大鼠ELISA試劑盒通常是采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。只要我們細心,測定操作其實非常簡單。
  大鼠ELISA試劑盒實驗原理:
  用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
  大鼠ELISA試劑盒性能:
  1.靈敏度:至小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
  2.特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
  3.重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
  大鼠ELISA試劑盒標本要求:
  1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
  大鼠ELISA試劑盒使用技巧建議:
  ·建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準確性。
  ·為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。
  ·未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人IgG工作液。
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