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NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書

簡要描述:

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更新時(shí)間:2018-10-30

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NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書

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產(chǎn)品名稱

NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書

英文名稱

NRK (rat kidney cells)

規(guī)格 

5×106cells/瓶×2

NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書功能:
(1)       血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)       表達(dá)鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)       與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化:
(1)       主動脈硬化。
(2)       主動脈瘤
(3)       主動脈鈣化。
基本特性:
(1)       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)       鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)       原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)       每凍存管細(xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)       肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
(6)       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。


大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基羽扇豆根瘤菌 Bradyrhizobium lupini

葡枝根霉 Rhizopus stolonifer釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

KiMA(人胚腎上皮細(xì)胞系)肺

美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳) Pleurotus sapidus中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

 細(xì)胞名稱HT-29, 人結(jié)腸細(xì)胞

大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

鮮綠青霉 Penicillium viridicatum大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

粘質(zhì)沙雷氏菌 Serratia marcescens淀粉酶產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces diastatochromogenes

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeJAR(人胎盤絨毛膜細(xì)胞)

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書0.625-40 ng/mL人骨形成蛋白15(BMP-15)ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mLELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 15

1.56-100 ng/mL人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mLELISA Kit for Human Breast cancer type 2 susceptibility protein

0.312-20 ng/mL人細(xì)胞凋亡調(diào)整器BAX(Apoptosis regulator BAX)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Apoptosis regulator BAX

0.312-20 ng/mL人骨形成蛋白1(BMP-1)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mLELISA Kit for Human Bone morphogenetic protein 1
NRK(大鼠腎細(xì)胞)說明書運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線

 

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